بیان، تخلیص و بررسی عملکرد ناحیه‏ کینازی گیرنده‏ نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی ۲bانسانی

نویسندگان

معصومه مقدسی

m. moghadasi department of medical biotechnology, faculty of para medicine, qazvin university of medical sciences, shahid bahonar blvd, qazvin, iran.قزوین، بلوار شهید باهنر، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، دانشکده پیراپزشکی،گروه بیوتکنولوژی پزشکی داریوش ایلغاری

d. ilghari dariush ilghari, department of clinical biochemistry and genetics, school of medicine, qazvin university of medical sciences, shahid bahonar blvd., qazvin, iranقزوین، بلوار شهید باهنر، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، دانشکده پزشکی،گروه بیوشیمی و ژنتیک، تلفن 3324971- 0281 نعمت اله غیبی

n. gheibi department of medical biotechnology, faculty of para medicine, qazvin university of medical sciences, shahid bahonar blvd, qazvin, iran.قزوین، بلوار شهید باهنر، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، دانشکده پیراپزشکی،گروه بیوتکنولوژی پزشکی مجید سیرتی ثابت

m. sirati-sabet department of clinical biochemistry and genetics, faculty of medicine, qazvin university of medical sciences, shahid bahonar blvd, qazvin, iran.قزوین، بلوار شهید باهنر، دانشگاه علوم پزشکی قزوین، دانشکده پزشکی،گروه بیوشیمی و ژنتیک فرهاد خباز

چکیده

زمینه: گیرنده‏ عامل رشد فیبروبلاستی 2b ( fgfr2b ) در مسیر پیام‏رسانی سلولی و تنظیم فرایندهای مهم زیستی از جمله تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. تغییرات ژنتیکی نظیر جهش نقطه‏ای در ناحیه­ تیروزین کینازی fgfr2b با سرطان پستان، تخمدان و رحم در ارتباط است.   هدف: مطالعه به منظور بیان و خالص‏سازی مقدار مناسبی از ناحیه کینازی fgfr2b انسانی انجام شد.   مواد و روش‏ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در دانشگاه علوم پزشکی قزوین انجام شد. پلاسمید pleics-01 که حاوی ژن ناحیه‏ تیروزین کینازی پروتئین نوترکیب fgfr2b بود به باکتری مستعد اشرشیاکلی bl21 جهت بیان ژن مورد نظر انتقال داده شد. بیا ن پروتئین نوترکیب با استفاده از iptg یک میلی‏مولار القا و با استفاده از الکتروفورز روی ژل پلی‏آکریل آمید در حضور sds ( sds-page ) ارزیابی شد. پروتئین بیان شده با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی توسط ستون حاوی ni2+-nta خالص شد. فعال بودن نمونه پروتئین بعد از دیالیز توسط تعامل با ناحیه­ sh2 فسفولیپاز c (plc) طبیعی و موتان توسط روش page بررسی شد. داده­ها با آزمون­های آماری واریانس یک طرفه و توکی تحلیل شدند.   یافته‏ها: بررسی sds-page قبل و بعد از القا شدن نشان داد که پروتئین بیان شده در دمای 20 درجه سانتی­گراد محلول بود. همچنین بررسی sds-page تأیید کرد که پروتئین خالص شده عاری از آلودگی بود و پروتئین­های باکتریایی نداشت. نتایج page فعال بودن پروتئین خالص شده را تأیید کرد.   نتیجه‏گیری: باتوجه به یافته­ها، ناحیه‏ کینازی گیرنده‏ نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2b که یک پروتئین 38 کیلودالتونی است، تولید و خالص شد که به صورت محلول و فعال بود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بیان، تخلیص و بررسی عملکرد ناحیه‏ کینازی گیرنده‏ نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2bانسانی

 زمینه: گیرنده‏ عامل رشد فیبروبلاستی 2b ( FGFR2b ) در مسیر پیام‏رسانی سلولی و تنظیم فرایندهای مهم زیستی از جمله تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. تغییرات ژنتیکی نظیر جهش نقطه‏ای در ناحیه­ تیروزین کینازی FGFR2b با سرطان پستان، تخمدان و رحم در ارتباط است.   هدف: مطالعه به منظور بیان و خالص‏سازی مقدار مناسبی از ناحیه کینازی FGFR2b انسانی انجام شد.   مواد و روش‏ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در...

متن کامل

اثر نیکل بر ساختار ناحیه کینازی گیرنده فاکتور رشد فیبروبلاستی نوع دو

Background & Aims: Fibroblast growth factor receptor type II (FGFR2b) is the essential factor of cellular signal transduction that regulates important biological processes including cell proliferation and differentiation. The inpairment in the signaling of these receptors is associated with several human pathology. Various factors including toxic metals can change the signaling pathways. This s...

متن کامل

اثر نیکل بر ساختار ناحیه کینازی گیرنده فاکتور رشد فیبروبلاستی نوع دو

پیش زمینه و هدف: گیرنده‏ فاکتور رشد فیبروبلاستی نوع دو در مسیر پیام رسانی سلولی و تنظیم فرآیندهای مهم زیستی ازجمله تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. اختلال در انتقال پیام این گیرنده با چندین اختلال پاتولوژیکی انسانی مرتبط می باشد. عوامل مختلف ازجمله فلزات سمی می توانند مسیرهای سیگنالینگ را دستخوش تغییر کنند.هدف: این مطالعه به منظور اثر فلز سمی نیکل بر ساختار ناحیه کینازی رسپتور فاکتور رشد فیب...

متن کامل

اثر فلاونوئید کوئرستین بر تغییرات ساختاری ناحیه کینازی پروتئین نوترکیب FGFR2b

Background and Aim: Antioxidants are compounds that protect cells from attacks of free radicals. Lack of balance between antioxidants and free radicals results in oxidative stress, which ultimately results in cell damage. The effects of flavonoids are not related solely to their antioxidant properties, but also to their effects on cellular signal pathways. The present study was conducted to eva...

متن کامل

بهینه سازی بیان، تخلیص و بررسی خاصیت ضد میکروبی پروتئین نوترکیب بتا دیفنسین 2 نوتروفیل‎های گاو

زمینه و هدف: دیفنسین‎ها یکی از بزرگ‎ترین خانواده‎ی پپتید‎های ضد میکروب می‎باشند که به واسطه‎ی فعالیت بر علیه باکتری‎ها، قارچ‎ها و بسیاری از ویروس‎ها به عنوان آنتی‎بیوتیک‎های نسل جدید منفعت بسیاری دارند. هدف از این مطالعه بهینه سازی بیان، تخلیص و بررسی خاصیت ضد میکروبی پروتئین بتا دیفنسین 2 نوتروفیل‎های گاو (BNBD2) بوده است. روش بررسی: در این مطالعه‎ی تجربی-آزمایشگاهی باکتری اشرشیاکلی B‏L21(DE3...

متن کامل

بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب ژن سنتتیک زنجیره HC تتانوتوکسین در سیستم بیانی پروکاریوت

زمینه و هدف: توکسین کلستریدیوم تتانی یا تتانواسپاسمین عامل بیماری مهلک کزاز است. امروزه از توکسوئید آن به عنوان واکسن استفاده می شود. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره L، HN و HC می باشد. زنجیره HC بخش اتصال دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندیدای واکسن مطرح می باشد. هدف از این مطالعه، طراحی و تهیه ژن صناعی زنجیره HC تتانواسپاسمین، بیان و بهینه سازی آن و تخلیص پروتئین نوترکیب حاصل از آن به عنو...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی قزوین

جلد ۱۸، شماره ۲، صفحات ۴-۱۱

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023